固定相的正交選擇性

      在分離度方程式中有三個變量：柱效（N）、選擇性（α）及保留因子（K）。我們可以看出，選擇性（α）是調(diào)整和提高分離度有效的參數(shù)。

      同時，色譜柱固定相是調(diào)整HPLC選擇性（見表B）中四個有效的參數(shù)之一。當(dāng)然，對于離子化分析物，流動相pH是有效的調(diào)節(jié)參數(shù)。此外，與色譜柱固定相同樣重要的還有流動相中有機(jī)溶劑（乙腈 vs 甲醇）的選擇、及有機(jī)溶劑含量/梯度斜率等等。

      在開發(fā)一個色譜分析方法時，可以有多種方式來實(shí)現(xiàn)特定的分離和保留需求。一種是采取系統(tǒng)篩選多個固定相的方式，針對不同的分析，HALO®有不同的固定相。用于小分子反相分離的HALO®固定相請見表C，固定相排序方式是根據(jù)pH 2.8和pH 7條件下與HALO® C18的選擇性差異而定的。例如，如果您在尋找一支低pH條件下與HALO® C18不同選擇性的色譜柱，您可以在表C中選擇HALO® PFP，因?yàn)檫@種固定相最有可能與C18正交。當(dāng)然，其他的 HALO®固定相例如Phenyl-Hexyl、ES-CN、Biphenyl、RP-Amide等等，因其與HALO® C18、HALO® C8、HALO® AQ-C18保留機(jī)理之差異，也可以作為進(jìn)行系統(tǒng)篩選的色譜柱之一或者一部分（圖L）。另一種方法是通過對類似固定相的反復(fù)試驗(yàn)來達(dá)到。以HALO® C18 和 HALO® AQ-C18為例，由表C可知，這兩個固定相之間不具備正交性，但HALO® AQ-C18的極性特點(diǎn)可能恰好是分析極性化合物所需要的。